Práctica 19: Seminograma.

1. Introducción.

Un seminograma es el estudio que se lleva a cabo de una muestra de semen con el fin de evaluar
su calidad seminal.

Esta prueba se realiza, a su vez, con un doble objetivo: el análisis cuantitativo que permite conocer
cuál es el volumen espermático o cantidad de esperma, además de la concentración y el número de
espermatozoides, y el análisis cualitativo que permite saber cómo es su viscosidad, color y otras
características.

Esta prueba es la primera con carácter diagnóstico que se lleva a cabo en tratamientos de repro-
ducción asistida y constituye la herramienta básica para detectar determinadas patologías o
cualquier alteración que pueda suponer un impedimento para el embarazo.

2. Materiales.

• Baño termostático.
• Incubadora.
• Microscopio óptico.
• Tubo de hemólisis.
• Colorante eosina-nigrosina.
• Solución de nigrosina.
• Portaobjetos y cubreobjetos.
• Cámara de Neubauer.
• Tiras reactivas de pH.
• Tubo cónico graduado.
• Pipetas Pasteur.
• Muestra de semen.
• Gradilla.

3. Procedimiento.

Tal cual recibamos la muestra la colocaremos dentro del baño termostático a 37ºC. Por otro lado,
colocamos 2 portaobjetos y cubreobjetos en la incubadora a 37ºC igualmente.

Comenzamos con el examen físico: valoramos la licuefacción, apariencia visual, color, viscosidad, volumen y pH.

La licuefacción y la viscosidad no se pueden datar debido a que la muestra ya se encontraba totalmente licuada, consecuencia de la transmisión de la muestra al laboratorio de período más largo de 30 minutos.

Para averiguar el volumen aspiramos el contenido del bote que contiene la muestra mediante una pipeta Pasteur estéril y lo vertemos en un tubo cónico graduado. Observamos dónde queda el menisco del líquido y lo anotamos dicha medición.

Respecto al pH, utilizaremos tiras reactivas de pH. Con la anterior pipeta colocamos una gota de la muestra de semen sobre una de las tiras reactivas y esperamos a que se produzca el cambio de color. Tras estabilizarse el color, lo comparamos con el patrón de pH que viene con las tiras.

Seguidamente se realiza un examen microscópico.

Examen en fresco: extraemos los portaobjetos de la incubadora. Con rapidez abrimos el tubo cónico y pipeteamos con la pipeta Pasteur el contenido para verter una gota en el portaobjetos, en el cual colocamos el cubreobjetos. Llevamos la preparación al microscopio y evaluamos la movilidad según la siguiente clasificación: movilidad progresiva rápida, movilidad progresiva lenta, movilidad no progresiva, inmóviles.

La vitalidad se averiguará realizando una tinción de eosina-nigrosina. En un tubo de hemólisis pipeteamos 2 gotas de esperma, cambiamos la pipeta Pasteur y pipeteamos otras 2 gotas del citado colorante. Esperamos 30 segundos y volvemos a pipetear 2 gotas de solución de nigrosina en el tubo. Agitamos con suavidad y lo llevamos al microscopio: aquellos que tengan la cabeza de color rojo significa que están muertos. Visualizamos diversos campos y anotamos cuántos hay vivos y muertos en cada uno, para más tarde hacer una regla de tres para traspasarlo a %.

Se deben de determinar anticuerpos antiespermáticos mediante pruebas de inmunocitoadherencia y tinción citomorfológica del semen (mediante tinción de Papanicolau), pero nosotros no lo realizamos porque no teníamos material.

Por último, la concentración espermática se calcula con la cámara de Neubauer.

4. Observaciones.

Todo el procedimiento hasta que lleguemos al cálculo de la concentración espermática debe de hacerse lo más rápido posible e intentando mantener una temperatura de 37º en el semen para que los espermatozoides no mueran. Es una muestra sensible que se debe analizar, como mucho, 30 minutos después de haber sido extraída.

Examen en fresco:

Tinción eosina-nigrosina:

5. Conclusiones.

Examen físico.

Volumen: 5’5 mL.

Color: normal.

Viscosidad: líquido.

pH: 8.

Exámen microscópico.

1. Movilidad:

1. Progresivos: 50%.
2. No progresivos: 50%.

2. Vitalidad.

1. Vivos: 27 (81’48%).
2. Muertos: 5 (18’52%).

6. Normas de seguridad y posibles peligros.

Estaremos atentos a que los objetivos del microscopio no topen con el mismo. El exceso de presión podrá romper el portaobjetos y echar a perder la práctica, además de provocar posibles fisuras en la lente del objetivo. Atenderemos al riesgo eléctrico de la toma de corriente del microscopio evitando que entren en contacto las manos o conductores eléctricos directamente con la toma. También evitaremos usarlo con las manos mojadas, sobre todo en la operación de enchufe y desenchufe, o la entrada de agua al sistema eléctrico. No ingerir ni tocar ninguna parte de la cara cuando se estén utilizando los colorantes.